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【摘要】 目的 了解我院耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床分布及耐药性特征,为临床合理使用抗生素提供参考依据。方法 常规方法做细菌培养,采用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪对分离菌进行鉴定和药敏试验,使用WHONET5.5软件对金黄色葡萄球菌进行数据统计分析。结果 我院2009年8月-2010年7月共分离出金黄色葡萄球菌200株,160株为MRSA,占80%;最常见的感染部位是下呼吸道和皮肤伤口;MRSA对青霉素等大多数抗生素耐药率明显高于苯唑西林敏感株,二者差异具有统计学意义;200株金黄色葡萄球菌均对万古霉素、替考拉宁和利耐唑胺敏感;同时对庆大霉素、环丙沙星、红霉素和克林霉素耐药的MR S A为138株,占86.25%,是主要的耐药模式;10株金黄色葡萄球菌为红霉素耐药克林霉素敏感株,D-试验阳性率为40%。结论 M R SA对多种抗菌药物耐药率高,绝大多数MRSA为多重耐药菌株;实验室应加强MRSA耐药性和克林霉素诱导型耐药监测,规范临床用药,隔离MRSA感染者,防止医源性传播。【关键词】 金黄色葡萄球菌 药敏试验 抗生素 耐药性
金黄色葡萄球菌是临床常见致病菌,随着青霉素及其他β-内酰胺类抗生素的广泛应用,耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(MR SA)大量产生,已成为大中型医院院内感染的重要病原菌之一,引起临床的高度重视[1,2]。本文回顾性总结2009年8月1日至2010年7月31日我院分离的200株金黄色葡萄球菌,对其感染状况及耐药性进行分析,为临床治疗提供参考。
一、材料与方法
1.菌株来源 菌株来源于2009年8月1日~2010年7月31日本院住院及门诊患者各类临床样本,包括痰、尿液、血液、胸水、腹水等。
2.菌株鉴定及药敏实验 采用全自动微生物分析系统VITEK 2 Compact进行鉴定和药敏试验,同时进行红霉素和克林霉素双纸片协同实验(D-试验),按CLSI/NCCLS2009年版标准判断,结果分为耐药(R)、中介(I)、敏感(S)。
3.质控菌株为金黄色葡萄球菌A T C C25923由卫生部临床检验中心提供,ATCC29213由中国医学科学院北京协和医院细菌室惠赠。
4.统计学方法 采用耐药分析软件WHONET5.5软件对药敏结果进行统计分析;率的比较采用SPSS13.0软件进行x2检验统计分析。
二、结果
1.金黄色葡萄球菌临床样本分布 2009年8月~2010年7月共分离出金黄色葡萄球菌200株,感染涉及多个部位,最常见的感染部位是下呼吸道和伤口,见表1。病区方面,I C U分离到56株,占23.5%;康复病区48株,占20.2%;呼吸科41株,占17.2%;干部病房37株,占15.6%;神内科21株,占8.8%;心外科3株,占1.2%;普外科6株,占2.5%;骨科6株,占2.5%;其他20株,占8.4%。
2.药敏结果 200株金黄色葡萄球菌中,MR S A160株,占80%;苯唑西林敏感(MSSA)40株,占20%。MRSA对万古霉素、替考拉宁和利耐唑胺敏感率为100%,对奎奴普丁/达福普叮敏感率达98.7%,M R S A同时对红霉素、环丙沙星、克林霉素、庆大霉素等表现出很高的耐药率。MS SA除对青霉素耐药性较高外,对其它抗菌药物的敏感性均较高,见表2。数据显示,MRSA对青霉素、环丙沙星、庆大霉素、红霉素、克林霉素、四环素、复方新诺明耐药率均明显高于MS SA菌株,二者差异具有统计学意义(P<0.05)。同时对庆大霉素、环丙沙星、红霉素和克林霉素耐药的M R S A菌株为138株,占86.25%,是主要的耐药模式。 3.D-试验结果 在200株金黄色葡萄球菌中,159株对红霉素耐药,其中10株对红霉素耐药而对克林霉素敏感,对该10株金黄色葡萄球菌进行克林霉素诱导试验(D-试验),4株呈阳性结果,阳性率为40%。
三、讨论
金黄色葡萄球菌是引起感染性疾病的重要致病菌,是医院感染的主要病原菌之一,侵袭性金黄色葡萄球菌感染常可导致患者死亡。根据本院一年来的统计资料,感染样本主要分布于痰和分泌物,特别是痰分离菌占76.5%。感染科室的分布依次是I C U、康复病区、呼吸科、干部病房和神经内科,这些病区收治的患者多为病情危重、老年人或住院时间较长且体质虚弱者,采用的治疗手段多为侵入性诊疗操作。
自1968年MRSA首次发现以来,MRSA造成的院内与院外感染均成上升趋势。2004年美国大部分医院MRSA感染率超过50%,2006年中国CHINET细菌耐药性监测显示MR SA在金黄色葡萄球菌感染中所占比例平均为76.3%[1]。统计显示,本院MRSA分离率较高,在200株金黄色葡萄球菌中,MRSA为160株,占80%,说明MRSA感染已经达到了很严重的程度。MRSA的耐药机制主要是产生新的靶蛋白而改变抗生素作用靶位,所有的MRSA都能产生出一种青霉素结合蛋白(penicillin-binding protein,PBP)PBP2a,这种蛋白在β-内酰胺类抗生素存在的情况下可以维持菌体细胞壁合成从而抑制胞体内其他青霉素结合蛋白活性,因此对几乎所有β-内酰胺类抗生素产生耐药。研究显示,本院分离的MR SA耐药严重,且呈多重耐药,M R S A对常用抗菌药物红霉素、环丙沙星、克林霉素和庆大霉素耐药率分别为90.6%、96.2%、86.2%和95.6%。同时对庆大霉素、环丙沙星、红霉素和克林霉素耐药的菌株为138株,占86.25%,是主要的耐药模式,提示针对MRSA感染,以上四种抗生素不应再成为治疗的选择。MRSA对万古霉素、替考拉宁和利耐唑胺敏感率为100%,对奎奴普丁/达福普叮敏感率为98.7%,以上四种抗生素可作为经验性用药选择。有研究[3,4]亦表明万古霉素、替考拉宁和利耐唑胺治疗效果相仿。克林霉素是治疗金黄色葡萄球菌引起的皮肤和软组织感染较有效的药物,也是社区感染病人比较有效的口服药物,常作为青霉素过敏病人的首选药物,但临床上可能因克林霉素诱导耐药而导致治疗失败。本研究中对10株红霉素耐药而克林霉素敏感的MRSA进行D-试验,结果4株呈阳性,阳性率为40%,因此,克林霉素诱导试验显得十分必要,微生物实验室应加强D-试验,阳性者,应报告两者均耐药。
预防和控制MRSA感染及扩散已非常迫切。临床上应依据微生物培养和药敏结果规范抗菌药物应用,特别注意慎用三代头孢菌素,降低MR SA的发生;要加强住院患者金黄色葡萄球菌感染和耐药情况的动态监测,特别强调医护人员规范洗手,防止通过医护人员的手传播耐药菌株。
参考文献
[1]李勇湧. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染现状与治疗进展[J].国外医药抗生素分册,2010.
[2]孙宏莉,王辉,陈民钧. 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查[J].中华微生物学和免疫学杂志,2005.
[3]刘于红,邹曰坤,李大伟,等.万古霉素与利奈唑胺治疗M R S A菌血症疗效比较[J].山东医药,2009.